Taq Pol é a enzima DNA polimerase recomendada para reações de PCR de rotina. É otimizada para alta especificidade e garante mínima formação de produtos inespecíficos. O sistema de tampão é recomendado para PCR baseado em placa e pipetagem automatizada. A atividade replicativa de DNA acontece a 72˚C. Cataliza a polimerização de nucleotídeos em dupla fita de DNA na direção 5’→ 3′ na presença de magnésio. Também possui atividade exonuclease no sentido 5’→ 3′ dependente de polimerização, mas a atividade exonuclease 3’→ 5′ é ausente.
Definição de unidade
Uma unidade é definida como a quantidade de enzima requerida para catalisar a incorporação de 10 nmoles de dNTPs em uma forma ácido-insolúvel em 30 minutos a 70 °C.
Taq Pol (tampa azul)
5 unidades/µL Taq DNA polimerase em 20 mM Tris-HCl, 100 mM KCl, 0.1 mM EDTA, 1 mM DTT, 0.5% Tween-20, 0.5% Nonidet P-40, 50% glicerol (v/v), pH 8.0 (25 °C)
Taq Reaction Buffer complete 10x (tampa vermelha)
200 mM Tris-HCl, 500 mM KCl, 20 mM MgCl2, pH 8.5 (25 °C)
MgCl2 Stock Solution (tampa amarela)
25 mM MgCl2